Количественный анализ пустырника пятилопастного

Количественный анализ пустырника пятилопастного

Аннотация научной статьи по биологии, автор научной работы — Нго Зиэп Т.Т., Жохова Е. В.

Предложено проводить оценку качества травы пустырника пятилопастного (Leonurus quinquelobatus Gilib.) и травы пустырника японского (Leonurus japonicus Houtt.) по содержанию суммы флавоноидов с использованием метода дифференциальной спектрофотометрии. Изучены условия извлечения флавоноидов из сырья. Определена оптическая плотность окрашенного комплекса с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм для травы пустырника пятилопастного и 410 нм для травы пустырника японского. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид в траве L. quinquelobatus в разные фазы вегетации составило 1,01-1,37 %. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в траве L. japonicus из разных мест произрастания составило 0,81-2,71 %. Относительная ошибка предложенной методики 1,51 и 1,54 % соответственно.

Похожие темы научных работ по биологии , автор научной работы — Нго Зиэп Т.Т., Жохова Е.В.,

Текст научной работы на тему «Разработка методики количественного определения суммарного содержания флавоноидов в траве пустырника спектрофотометрическим методом»

РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУММАРНОГО СОДЕРЖАНИЯ ФЛАВОНОИДОВ В ТРАВЕ ПУСТЫРНИКА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

© Зиэп Т. Т. Нго, Е.В. Жохова

Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия, ул. Профессора Попова, 14, Санкт-Петербург, 197376 (Россия)

Предложено проводить оценку качества травы пустырника пятилопастного (Leonurus quinquelobatus Gilib.j и травы пустырника японского (Leonurus japonicus Houtt.j по содержанию суммы флавоноидов с использованием метода дифференциальной спектрофотометрии. Изучены условия извлечения флавоноидов из сырья. Определена оптическая плотность окрашенного комплекса с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм для травы пустырника пятилопастного и 410 нм для травы пустырника японского. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид в траве L. quinquelobatus в разные фазы вегетации составило 1,01-1,37%. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в траве L. japonicus из разных мест произрастания составило 0,81-2,71%. Относительная ошибка предложенной методики — 1,51 и 1,54% соответственно.

Род пустырник (Leonurus L.) включает около 25 видов, произрастающих по всему миру: в Европе, Азии, Африке и Америке; 13 видов встречаются на территории России [1]. В Фармакопею XI издания [2] включена трава пустырника (производящие растения: пустырник сердечный — L. cardiaca L. и пустырник пятилопастный — L. quinquelobatus Gilib.), препараты которой применяются в качестве седативного средства. Изменение №5 к частной статье ГФ XI предусматривает оценку качества сырья травы пустырника по содержанию иридоидов в пересчете на Государственный стандартный образец (ГСО) гарпагида ацетата, который является недоступным для многих лабораторий.

Под тем же названием Herba Leonuri в Фармакопеи Вьетнама и Китая включена трава пустырника японского — L. japonicus Houtt., которая используется в составе многих гинекологических и утеротонических сборов, а метод количественного определения содержания действующих веществ в сырье и препаратах пустырника японского вообще отсутствует.

Химический состав сырья указанных видов пустырника разнообразен и представлен флавоноидами, алкалоидами, кумаринами, дубильными веществами, терпеновыми соединениями [3-6]. Среди этого комплекса биологически активных веществ особо выделяются флавоноиды как группа соединений, имеющая широкий спектр фармакологической активности.

Цель настоящего исследования — разработка методики количественного определения суммы флавонои-дов в траве пустырника пятилопастного и траве пустырника японского с использованием метода дифференциальной спектрофотометрии.

* Автор, с которым следует вести переписку.

Объектами исследования послужили образцы сырья пустырника пятилопастного, культивируемого в Ленинградской области (питомник лекарственных растений СПХФА), а также образцы пустырника японского, произрастающего на территории Вьетнама, Китая и культивируемого в Ленинградской области. Траву заготавливали в разные фазы вегетации, срезая олиственные верхушки побегов длиной до 40 см и толщиной стебля не более 0,5 см. Сушку осуществляли воздушно-теневым способом, разложив сырье тонким слоем и периодически переворачивая. Затем сырье измельчали и просеивали через сито с диаметром отверстий 1, 2 и 5 мм. Влажность сырья определяли по методике ГФ XI [7]. Статистическую обработку результатов проводили по общепринятой методике [7].

Методом хроматографии в тонком слое сорбента с использованием пластин «Sorbfil-ПТСХ-П-А-УФ» в системе хлороформ-этилацетат-кислота уксусная (4 : 10 : 5) установили, что одним из основных компонентов суммы флавоноидов, присутствующих в траве пустырника пятилопастного, является цинарозид, а в траве пустырника японского — рутин. На регистрирующем спектрофотометре «Shimadzu» (Япония) — «UV 1240 mini» снимали спектры спиртовых извлечений из образцов сырья в диапазоне длин волн от 360 до 450 нм. Максимум поглощения окрашенного комплекса спиртового извлечения из травы пустырника пятилопастного с раствором алюминия хлорида наблюдался при длине волны 400±2 нм. Аналогичный максимум поглощения отмечен для комплекса ГСО цинарозида (лютеолин-7-глюкозид) с алюминия хлоридом (рис. 1). Максимум поглощения окрашенного комплекса спиртового извлечения из травы пустырника японского с раствором алюминия хлорида наблюдался при длине волны 410±2 нм. Аналогичный максимум поглощения отмечен для комплеса ГСО рутина с алюминия хлоридом (рис. 2). Это дает возможность использовать длину волны 400 нм в качестве аналитической для пустырника пятилопастного и 410 нм — для пустырника японского.

При разработке методики количественного определения суммы флавоноидов изучали условия экстракции в зависимости от степени измельченности сырья, соотношения сырья и экстрагента, концентрации спирта этилового, времени экстрагирования и полноты комплексообразования с 1% спиртовым раствором алюминия хлорида. Наиболее полное извлечение определяемых веществ достигалось с использованием 70% спирта этилового, в образцах сырья со степенью измельченности 1 мм, временем экстрагирования 2 ч и соотношением сырья и экстрагента 1 : 100 (табл. 1, 2).

Стабильность комплекса определяемой суммы флавоноидов травы пустырника пятилопастного и ГСО цинарозида достигается после 20 мин, устойчивость комплекса сохраняется в течение 15-20 мин. Стабильность комплекса определяемой суммы флавоноидов травы пустырника японского и ГСО рутина достигается после 40 мин, устойчивость комплекса сохраняется в течение 20-30 мин.

Методика количественного определения суммы флавоноидов в траве пустырника. Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 0,5 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл 70% спирта этилового. Колбу взвешивали с погрешностью ±0,01 г, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры колбу вновь взвешивали и доводили до первоначальной массы 70% спиртом этиловым. Содержимое колбы фильтровали через воронку диаметром 7 см с вложенным ватным тампоном, отбрасывая первые 20 мл фильтрата.

Рис. 1. Спектры поглощения окрашенных комплексов с алюминия хлоридом: 1 — раствор ГСО цинарозида; 2 — извлечение 70% спиртом этиловым из травы пустырника пятилопастного

Рис. 2. Спектры поглощения окрашенных комплексов с алюминия хлоридом: 1 — раствор ГСО рутина; 2 — извлечение 70% спиртом этиловым из травы пустырника японского

Таблица 1. Влияние условий экстракции

на суммарное содержание флавоноидов в траве пустырника пятилопастного

Таблица 2. Влияние условий экстракции

на суммарное содержание флавоноидов в траве пустырника японского

Условия экстракции Содержание флавоноидов, % Условия экстракции Содержание флавоноидов, %

Размер частиц, мм Размер частиц, мм

1,00 1,01 1,00 0,81

2,00 0,85 2,00 0,66

5,00 0,53 5,00 0,51

Экстрагент спирт этиловый, % Экстрагент спирт этиловый, %

40 Помутнение раствора, ис- 40 Помутнение раствора, ис-

пользуемого для спектрофо- пользуемого для спектрофо-

тометрии, трудность фильт- тометрии, трудность фильт-

Соотношение сырья и экстрагента Соотношение сырья и экстрагента

1 : 25 0,78 1 : 25 0,65

1 : 50 0,95 1 : 50 0,75

1 : 100 1,01 1 : 100 0,81

1 : 120 1,00 1 : 120 0,81

Время экстракции, мин (70% спирт этиловый, соотно- Время экстракции, мин (70% спирт этиловый, соотно-

шение 1 : 100) шение 1 : 100)

120 1,01 120 0,81

180 0,99 180 0,80

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 2 мл профильтрованного извлечения, добавляли 2 мл 1% раствора алюминия хлорида в 95% спирте этиловом и доводили объем раствора 95% спиртом этиловым до метки. Для приготовления раствора сравнения в другую колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мл фильтрата и доводят до метки 95% спиртом этиловым. Измерение оптической плотности проводили через 20 минут на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм для пустырника пятилопастного и через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм для пустырника японского. Параллельно измерили оптическую плотность раствора ГСО цинарозида (для пустырника пятилопастного) и рутина (для пустырника японского). Для этого 2 мл 0,02% раствора стандарта помещали в мерную колбу 25 мл, прибавляли 2 мл 1% раствора алюминия хлорида и доводили до метки 95% спиртом этиловым.

Суммарное содержание флавоноидов в сухом сырье в пересчете на стандарт и абсолютно сухое сырье вычисляли по формуле:

X D х m0 х 50 х100 _ D0 х m х (100 — W),

где D — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 — оптическая плотность раствора ГСО стандарта; m — масса сырья, г; m0 — масса ГСО стандарта, г; W — потеря в массе при высушивании сырья, %.

Примечание. Приготовление раствора Государственного стандартного образца (ГСО) цинарозида: около

0,01 г (точная навеска) ГСО цинарозида, предварительно высушенного при температуре 130-135 °С в течение 3 ч, растворяли в 85 мл 95% спирта этилового в мерной колбе местимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждали, количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивали.

Приготовление раствора Государственного стандартного образца (ГСО) рутина: около 0,02 г (точная навеска) ГСО рутина, предварительно высушенного при температуре 130-135 °С в течение 3 ч, растворяли в 85 мл 95% спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждали, количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивали.

Читайте также:  Как ухаживать за глицинией в саду

Для проверки воспроизводимости методики проведено 8 независимых определений для каждого вида сырья. Результаты статистической обработки свидетельствуют о том, что ошибка единичного определения с доверительной вероятностью 95% не превышает 5% (табл. 3, 4).

С целью исключения систематической ошибки методики проведены опыты с добавками цинарозида к навеске сырья пустырника пятилопастного и рутина к навеске сырья пустырника японского. Установлено, что относительная ошибка метода не превышает ±5%, т.е. находится в пределах случайной ошибки разработанной методики, что указывает на отсутствие систематической ошибки (табл. 5, б).

Разработанная методика количественного определения суммарного содержания флавоноидов была апробирована на образцах сырья из разных мест произрастания, заготовленных в различные фазы вегетации. Наиболее высокое содержание суммы флавоноидов наблюдалось в образцах сырья пустырника японского, культивируемого в Ленинградской области, и составило до 2,7б±0,04% в фазе активного роста. Результаты представлены в таблицах 7 и 8.

Таблица 3. Результаты количественного

определения суммарного содержания флавоноидов в траве пустырника пятилопастного и их метрологическая характеристика

Таблица 4. Результаты количественного

определения суммарного содержания флавоноидов в траве пустырника японского и их метрологическая характеристика

№ Содержание Метрологическая № Содержание Метрологическая

определения флавоноидов, % характеристика определения флавоноидов, % характеристика

1 0,98 X = 1,01 1 0,83 X = 0,81

2 1,03 S = 0,0185 2 0,82 S = 0,0151

3 1,00 S x = 0,0065 3 0,82 S x = 0,0053

4 1,02 t(95%, 7) = 2,36 4 0,79 t(95%, 7) = 2,36

5 1,02 Ax = 0,0437 5 0,80 Ax = 0,0356

б 0,99 A x = 0,0153 б 0,79 A x = 0,0125

7 1,01 є = 4,33% 7 0,81 є = 4,40%

8 1,03 є = 1,51% 8 0,82 є = 1,54%

Таблица 5. Результаты количественного определения суммарного содержания флавоноидов в траве пустырника пятилопастного с использованием метода добавок ГСО цинарозида

Содержание флаво-ноидов в 1 г сырья, мг Добавлено ГСО цинарозида, мг Содержание флавоноидов, мг Относительная ошибка, %

должно быть найдено

10,1 7,3 17,4 17,4 0

10,1 7,3 17,4 17,2 -1,1

10,1 14,6 24,7 24,5 -0,8

Таблица б. Результаты количественного определения суммарного содержания флавоноидов в траве пустырника японского с использованием метода добавок ГСО рутина

Содержание флаво-ноидов в 1 г сырья, мг Добавлено ГСО рутина, мг Содержание флавоноидов, мг Относительная ошибка, %

должно быть найдено

8,1 4,7 12,8 12,9 +0,8

8,1 4,7 12,8 12,6 -1,6

8,2 5,3 13,5 13,9 +3,0

Таблица 7. Результаты количественного определения суммарного содержания фланоноидов в траве пустырника пятилопастного

Место сбора Дата сбора Фаза вегетации Содержание флавоноидов, %

Ленинградская область 30.06.2006 Массовое цветение 1,01±0,02

Ленинградская область 02.08.2006 Начало плодоношения 1,37 ±0,02

Таблица 8. Результаты количественного определения суммарного содержания фланоноидов в траве пустырника японского

Место сбора Дата сбора Фаза вегетации Содержание флавоноидов, %

Ленинградская область 09.2006 Активный рост 2,7б±0,04

Ленинградская область 09.2006 Начало бутонизации 2,58±0,04

Южный Китай 06.2006 Начало бутонизации 1,б3±0,03

Северный Вьетнам 06.2006 Начало бутонизации 1,73±0,03

Южный Вьетнам 07.2006 Массовое цветение 0,81±0,01

1. Изучены условия экстракции и спектрофотометрического определения флавоноидов в траве пустырника пятилопастного и траве пустырника японского.

2. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в траве пустырника пятило-пастного в пересчете на цинарозид и траве пустырника японского в пересчете на рутин. Относительная ошибка предложенной методики составила 1,51 и 1,54% соответственно.

3. Определено, что образцы сырья пустырника японского, культивируемого в Ленинградской области, имеют довольно высокое содержание флавоноидов в сравнении с образцами, собранными в местах естественного произрастания данного вида.

1. Черепанов С.К. Сосудистые растения России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР). СПб., 1995. 989 с.

2. Государственная фармакопея СССР. XI издание. Вып. 2. М., 1990. 398 с.

3. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Сем. Hippuridaceae -Lobeliaceae. СПб., 1991. 198 с.

4. Phan Minh Giang, Phan Tong son, Katsuyoshi Matsunami, Hideaki Otsuka. New Labdane-Type Diterpenoids from Leonurus heterophyllus Sw. // Chem.Pharm.Bull. 2005. V. 53. №8. P. 938-941.

5. Phan Minh Giang, Phan Tong son, Katsuyoshi Matsunami, Hideaki Otsuka. New Bis-spirolabdane-Type Diterpenoids from Leonurus heterophyllus Sw. // Chem.Pharm.Bull. 2005. V. 53. №11. P. 1475-1479.

6. Chao Z., Ma L.L., Zhou X.J. Determination of stachydrine and leonurine in Herba Leonuri by ion-pair reserved-phase high-performance liquid chromatography // Di Yi Jun Da Xue Xue Bao. 2004. V. 24. №11. P. 1223-1226.

7. Государственная фармакопея СССР. XI издание. Вып. 1. М., 1987. 334 с.

Аннотация научной статьи по медицине и здравоохранению, автор научной работы — Величко Виктория Владимировна, Макарова Дарья Леонидовна

Проведен сравнительный фармакогностический анализ травы пустырника пятилопастного и зопника клубненосного. Определены отличительные микродиагностические признаки. Наибольшее накопление БАС в траве пустырника происходит в фазу цветения, в траве зопника в фазу вегетации. При сравнительном анализе установлено, что из травы зопника извлекается большее количество БАС, чем из травы пустырника, наилучшим экстрагентом при этом является спирт этиловый 40 %. Исследуемые виды отличаются по содержанию основных групп БАС, поэтому их совместная заготовка и применение недопустимы. Зопника трава может рассматриваться как перспективный вид нового лекарственного растительного сырья и БАС.

Похожие темы научных работ по медицине и здравоохранению , автор научной работы — Величко Виктория Владимировна, Макарова Дарья Леонидовна,

COMPARATIVE PHARMACOGNOSTIC ANALYSIS OF LEONURUS QUINQUELOBATUS AND SAGE-LEAF MULLEIN

The comparative pharmacognostic analysis of herbal of Leonurus quinquelobatus and sage-leaf mullein is carried out. Distinctive microdiagnostic signs are defined. The greatest accumulation the BAC in the herbal of Leonurus quinquelobatus originates in a blossoming phase, in sage-leaf mullein in a vegetation phase. According to comparative analysis it was established that the larger quantity the BAC is extracted from sage-leaf mullein than from Leonurus quinquelobatus, thus the best extractant is alcohol of ethyl 40 %. The studied types differ according to the BAC maintenance of the main groups therefore their joint preparation and application are inadmissible. Sage-leaf mullein can be considered as a perspective sort of new medicinal vegetable raw materials and BAC.

Текст научной работы на тему «Сравнительный фармакогностический анализ пустырника пятилопастного и зопника клубненосного»

№ 4 — 2015 г. 14.00.00 Медицинские науки (14.04.00 Фармацевтические науки)

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПУСТЫРНИКА ПЯТИЛОПАСТНОГО И ЗОПНИКА КЛУБНЕНОСНОГО

В. В. Величко, Д. Л. Макарова

ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава

России (г. Новосибирск)

Проведен сравнительный фармакогностический анализ травы пустырника пятилопастного и зопника клубненосного. Определены отличительные микродиагностические признаки. Наибольшее накопление БАС в траве пустырника происходит в фазу цветения, в траве зопника — в фазу вегетации. При сравнительном анализе установлено, что из травы зопника извлекается большее количество БАС, чем из травы пустырника, наилучшим экстрагентом при этом является спирт этиловый 40 %. Исследуемые виды отличаются по содержанию основных групп БАС, поэтому их совместная заготовка и применение недопустимы. Зопника трава может рассматриваться как перспективный вид нового лекарственного растительного сырья и БАС.

Ключевые слова: фармакогностический анализ, трава пустырника пятилопастного, трава зопника клубненосного, спектрофотометрия, биологически активные соединения, флавоноиды.

Величко Виктория Владимировна — кандидат фармацевтических наук, заведующий кафедрой фармакогнозии и ботаники ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 225-07-13, e-mail: velichkvik@rambler.ru

Макарова Дарья Леонидовна — кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармакогнозии и ботаники ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 225-07-13, e-mail: mak_dl@mail.ru

Пустырник пятилопастной (Leonurus quinqueIobatus Gilib.) — распространенное растение флоры Сибири [5]. В научной медицине препараты пустырника применяют в качестве успокаивающего средства при повышенной нервной возбудимости, сердечно-сосудистых неврозах и ранних стадиях гипертонической болезни [2, 3]. В народной медицине

пустырник пятилопастной используют при повышенной нервной возбудимости, неврастении, бессоннице, головных болях. Пустырника трава используется самостоятельно в качестве лекарственного средства в виде настоя, входит в состав сборов (Фитоседан № 2 и 3), биологически активных добавок («АЛФИТ-9», «Пустырник форте», «Формула сна» и др.) и комплексных препаратов («Фито Ново-Сед» и «Седофлор») [2].

Недопустимой примесью при заготовке травы пустырника пятилопастного является очень схожее по морфологическим признакам растение — зопник клубненосный (Phlomis tuberosa L.). Его химический состав недостаточно изучен [4], вследствие чего он используется только в народной медицине в качестве антибактериального, противовоспалительного средства при пневмонии, бронхите, желтухе и как вяжущее, ранозаживляющее и тонизирующее средство. В научной медицине данное растение не используется. Поэтому актуальным является проведение сравнительного фармакогностического исследования травы пустырника пятилопастного и травы зопника клубненосного.

Материалы и методы. Объектами исследования служили 6 образцов воздушно-сухого сырья травы пустырника и травы зопника (табл. 1), заготовленные на территории Искитимского района Новосибирской области от дикорастущих растений в разные фазы вегетации.

№ п/п Название сырья Дата сбора Фаза развития

1 Зопника трава 17.06.2014 Ф.вегетации

2 Зопника трава 10.07.2014 Ф. цветения

3 Зопника трава 05.08.2014 Ф. плодоношения

4 Пустырника трава 15.06.2014 Ф.вегетации

5 Пустырника трава 07.07.2014 Ф. цветения

6 Пустырника трава 03.08.2014 Ф. плодоношения

Основные группы биологически активных соединений (БАС), компонентный состав и их количественное содержание определяли с помощью общепринятых в фитохимическом анализе методов [1, 5], в частности, методами тонкослойной хроматографии (ТСХ), спектрофотомерии, гравиметрии, титриметрии. Идентификацию обнаруженных БАС проводили в сравнении со стандартными веществами. Спектрофотометрическое исследование проводилось на приборе СФ-56. Анатомо-морфологический анализ листьев выполнялся на микроскопе «Микмед» при увеличении в 150 и 600 раз. Определение числовых показателей сырья проводили согласно методикам ГФ XI и ГФ XII [1].

Результаты исследований. Важным этапом стандартизации лекарственного растительного сырья является определение показателей подлинности. При микроскопическом исследовании листовой пластинки пустырника видны клетки эпидермы с тонкими извилистыми стенками (рис. 1), особенно на нижней стороне. Устьица многочисленные, устьичный аппарат аномоцитного типа (рис. 2). Волоски двух типов: многоклеточные грубобородавчатые, расширенные в местах соединения клеток (рис. 3); и мелкие головчатые на одноклеточной короткой ножке с округлой головкой (рис. 4). Эфиромасличные железки на короткой ножке с 4-мя — 6-ю выделительными

Читайте также:  Виды односкатных крыш фото

клетками, характерные для семейства губоцветных (рис. 5, 6).

Рис. 1. Клетки эпидермы с тонкими извилистыми стенками

Рис. 2. Устьичный аппарат аномоцитного типа

Рис. 3. Грубобородавчатый волосок

Рис. 4. Головчатый волосок

Рис. 5. Эфиромасличная железка (вид сверху)

Рис. 6. Эфиромасличная железка (вид сбоку)

При рассмотрении поверхностного препарата листа зопника установлены следующие диагностические признаки: клетки эпидермы с сильно извилистыми стенками, устьичный аппарат аномоцитного типа (рис. 7), эфиромасличные железки на короткой ножке с 4-мя — 6-ю выделительными клетками (рис. 8) и простые многоклеточные волоски, обильно расположенные по всей листовой пластинке (рис. 9).

Рис. 7. Устьичный аппарат аномоцитного типа

Рис. 8. Простые многоклеточные волоски и эфиромасличные железки

Рис. 9. Эфиромасличные железки

Общий фитохимический анализ выявил наличие в сырье основных групп БАС: флавоноидов, гидроксикоричных кислот, дубильных веществ, полисахаридов.

При исследовании качественного состава фенольных соединений установлено присутствие хлорогеновой кислоты в траве пустырника и траве зопника и присутствие рутина в траве зопника.

При добавлении к извлечению из травы пустырника 5 % спиртового раствора алюминия хлорида (А1С13) не наблюдалось желтого окрашивания раствора и батохромного сдвига на электронном спектре поглощения в УФ-области. При этом наблюдался спектр, схожий со спектром хлорогеновой кислоты (рис. 10), а при добавлении к извлечению из травы зопника раствора А1С13 наблюдалось желтое окрашивание раствора и батохромный сдвиг на УФ-спектре, что подтверждает присутствие рутина (рис. 11).

Длз1 на полны, 1ем

I 1 ‘ ‘ ‘ I 1 ‘ ‘ ‘ I 1 ‘ ‘ 1 I 1 ‘ ■ ‘ I 1 1 ‘ ‘ I 550 ЗКМ ВО «О 450 500

Рис. 10. Электронный спектр поглощения спиртового извлечения из травы пустырника

в УФ-области (метод — дифференциальная спектрофотометрия); зел. — чистое извл. ф. вегетации; син. — чистое извл. ф. цветения; крас. — извлечение ф. цветения с добавлением AlCl3

0.? — ; 0.8 — (1.7 — Ё 0.6 — | ОЛ — ; М — : 0 3-1 02 — | он -1 м -;

■ — I ■ к ■ ч ‘ I 1 1 I ‘ ■ 1 Г"1 I 1 _I " ■ 1 Г

КО Ж -аде «О 460 480

Рис. 11. Электронный спектр поглощения спиртового извлечения из травы пустырника

в УФ-области (метод — дифференциальная спектрофотометрия);

зел. — чистое извл. ф. цветения; син. — извлечение ф. цветения с добавлением ДЮН

Определение количественного содержания гидроксикоричных кислот проводили методом прямой спектрофотометрии в пересчете на хлорогеновую кислоту, так как при определении качественного состава гидроксикоричных кислот было установлено, что она является преобладающей в траве пустырника и траве зопника (табл. 2).

Количественное содержание суммы гидроксикоричных кислот в спиртовых извлечениях из травы пустырника и травы зопника, % в пересчете на кислоту

хлорогеновую и абсолютно сухое сырье

Экстрагент Образец сырья

Пустырника трава Зопника трава

ф. вегетац. ф. цветен. ф. плодон. ф. вегетац. ф. цветен. ф. плодон.

Спирт этиловый 20 % 1,5 ± 0,02 2,4 ± 0,03 2,1 ± 0,02 6,2 ± 0,03 5,7 ± 0,04 6,0 ± 0,03

Спирт этиловый 40 % 1,7 ± 0,01 2,7 ± 0,03 2,3 ± 0,02 8,0 ± 0,04 6,6 ± 0,02 5,7 ± 0,03

Спирт этиловый 70 % 1,6 ± 0,03 2,5 ± 0,04 2,2 ± 0,03 5,1 ± 0,03 4,1 ± 0,02 2,7 ± 0,02

В траве пустырника наибольшее накопление гидроксикоричных кислот отмечено в фазу цветения, у зопника — в фазу вегетации. Наилучшим экстрагентом для извлечения данной группы БАС из изучаемых видов сырья является спирт этиловый 40 %. При этом из травы пустырника извлекается не менее 2,7 % гидроксикоричных кислот, из травы зопника выход гораздо выше — не менее 8,0 %.

Определение суммы флавоноидов в траве зопника проводилось методом дифференциальной спектрофотометрии в пересчете на рутин (табл. 3).

Содержание суммы флавоноидов в спиртовых извлечениях из травы зопника, % в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье

Экстрагент Образец сырья

фаза вегетации фаза цветения фаза плодоношения

Спирт этиловый 20 % 1,4 ± 0,03 1,2 ± 0,02 0,8 ± 0,01

Спирт этиловый 40 % 1,7 ± 0,03 1,5 ± 0,02 1,1 ± 0,02

Спирт этиловый 70 % 1,6 ± 0,04 1,4 ± 0,03 1,0 ± 0,02

Наибольшим содержанием флавоноидов характеризуется сырье, заготовленное в период вегетации. Наилучшим экстрагентом для извлечения данной группы БАС является спирт этиловый 40 %, при этом количественное содержание флавоноидов должно быть не менее 1,7 %.

При определении количественного содержания дубильных веществ по фармакопейной методике [1] было выявлено, что в траве зопника содержание данной группы БАС примерно в 2 раза выше, чем в траве пустырника. При этом в траве пустырника наибольшее содержание отмечено в фазу цветения (не менее 4,5 %), в траве зопника — в фазу вегетации — не менее 10,0 % (табл. 4).

Количественное содержание дубильных веществ в водных извлечениях из травы пустырника и травы зопника, % в пересчете на абсолютно сухое сырье

Образец сырья Фаза развития

фаза вегетации фаза цветения фаза плодоношения

Пустырника трава 3,3 ± 0,1 4,5 ± 0,2 4,3 ± 0,2

Зопника трава 10,1 ± 0,2 9,5 ± 0,3 9,7 ± 0,3

При определении количественного содержания полисахаридов методом гравиметрии было выявлено, что содержание водорастворимых полисахаридов в траве пустырника

составляет не менее 0,5 %, в траве зопника — не менее 2,0 %, при этом сохраняется выявленная динамика накопления данной группы БАС: в траве пустырника наибольшее содержание отмечено в фазу цветения, в траве зопника — в фазу вегетации.

При использовании метода гидродистилляции эфирное масло из сырья получить не удалось.

Определены показатели влажности и зольности для исследуемых видов сырья. Влажность травы пустырника не превышает 10,0 %, травы зопника — не выше 12,0 %. Зола общая травы пустырника не более 8 %, травы зопника — не более 9 %.

1. Определены отличительные микродиагностические признаки пустырника травы и зопника травы.

2. Установлено присутствие основных групп БАС: флавоноидов, гидроксикоричных кислот, дубильных веществ, полисахаридов, аскорбиновой кислоты.

3. При сравнительном анализе установлено, что из травы зопника извлекается большее количество БАС, чем из травы пустырника, наилучшим экстрагентом для извлечения основных групп БАС является спирт этиловый 40 %.

4. Наибольшее накопление БАС в траве пустырника происходит в фазу цветения, в траве зопника — в фазу вегетации.

5. Исследуемые виды отличаются по количественному содержанию основных групп БАС, поэтому их совместная заготовка и применение недопустимы. При этом зопника трава может рассматриваться как перспективный источник нового вида лекарственного растительного сырья и БАС.

1. Государственная Фармакопея СССР. XI изд. Вып.1, 2. — М. : Медицина, 1987.

2. Государственный реестр лекарственных средств. — Режим доступа : (http://gr1s.rosminzdrav.ru). — Дата обращения : 10.08.2015.

3. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Список общих фармакопейных статей и фармакопейных статей. — Режим доступа :

(http://www.rosminzdrav.ru/ministry/61/11/materia1y-po-deyate1nosti-deparatamenta/stranit sa-856/spisok-obschih-farmakopeynyh-statey). — Дата обращения : 10.08.2015.

4. Полина С. А. Сравнительный анализ компонентного состава эфирного масла зопника клубненосного Сибирского региона / С. А. Полина, А. А. Ефремов // Химия растительного сырья. — 2013. — № 2. — С. 113-118.

5. Растительные ресурсы СССР : цветковые растения, их химический состав, использование ; семейства Hippuridaceae — Lobe1iaceae. — СПб. : Наука, 1991. — С. 42-43.

6. Флавоноиды : биохимия, биофизика, медицина / Ю. С. Тараховский [и др.] ; отв. ред. Е. И. Маевски. — Пущино : Sуnchrobook, 2013. — 310 с.

COMPARATIVE PHARMACOGNOSTIC ANALYSIS OF LEONURUS QUINQUELOBATUS AND SAGE-LEAF MULLEIN

V. V. Velichko. D. L. Makarova

SBEIHPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health» (Novosibirsk)

The comparative pharmacognosy analysis of herbal of Leonurus quinquelobatus and sage-leaf mullein is carried out. Distinctive microdiagnostic signs are defined. The greatest accumulation the BAC in the herbal of Leonurus quinquelobatus originates in a blossoming phase, in sage-leaf mullein — in a vegetation phase. According to comparative analysis it was established that the larger quantity the BAC is extracted from sage-leaf mullein than from Leonurus quinquelobatus, thus the best extractant is alcohol of ethyl 40 %. The studied types differ according to the BAC maintenance of the main groups therefore their joint preparation and application are inadmissible. Sage-leaf mullein can be considered as a perspective sort of new medicinal vegetable raw materials and BAC.

Keywords: pharmacognostic analysis, herbal of Leonurus quinquelobatus, herbal of Sage-leaf mullein, spectophotometery, biologically active compounds, flavonoids.

Velichko Victoria Vladimirovna — candidate of pharmaceutical science, head of pharmacognosy and botany chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», office phone: 8 (383) 225-07-13, e-mail: velichkvik@rambler.ru

Makarova Daria Leonidovna — candidate of pharmaceutical science, assistant professor of pharmacognosy and botany chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», office phone: 8 (383) 225-07-13, e-mail: mak_dl@mail.ru

List of the Literature:

1. State Pharmacopoeia of the USSR. XI ed. Iss.1, 2. — M. : Medicine, 1987.

2. State register of medicines [electron resource]. — Access mode : (http://grls.rosminzdrav.ru). — Access date : 10.08.2015.

3. Ministry of Health of the Russian Federation. List of the general officinal articles and officinal articles [electron resource]. — Access mode :

http://www.rosminzdrav.ru/ministry/61/11/materialy-po-deyatelnosti-deparatamenta/stranits a-856/spisok-obschih-farmakopeynyh-statey). — Access date : 10.08.2015.

4. Polina S. A. Comparative analysis o component structure of essential oil of sage-leaf mullein of Siberian region / S. A. Polina, A. A. Efremov // Chemistry of vegetable raw materials.

Читайте также:  Клубника холидей описание сорта фото отзывы садоводов

— 2013. — N 2. — P. 113-118.

5. The USSRVegetable resources : floral plants, their chemical composition, use ; Hippuridaceae families — Lobeliaceae. — SPb. : Science, 1991. — P. 42-43.

6. Flavonoids : biochemistry, biophysics, medicine / Y. S. Tarakhovsky [et al.] ; editor-in-chief E. I. Mayevski. — Pushchino : Synchrobook, 2013. — 310 p.

Трава пустырника — Herba Leonuri

Пустырник сердечный (обыкновенный) — Leonurus cardiaca L.

Пустырник пятилопастный — Leonurus quinquelobatus Gilib.

Семейство яснотковые — Lamiaceae

— пустырник волосистый

— пустырник мохнатый

— собачья крапива

— сердечная трава

— сердечник

— крапива глухая

Ботаническая характеристика. Многолетние травянистые растения высотой от 30 до 100 см, с зеленым четырехгранным, густо опушенным, ветвистым стеблем. Листья черешковые, нижние 5-7-пальчато-раздельные, верхние — тройчатораздельные и тройчатолопастные, накрест супротивные. Цветки мелкие, расположены в пазухах листьев. Венчик двугубый (диагностический признак), розового цвета. Плод дробный, распадающийся на 4 орешка. Цветет с июня до осени.

Распространение. Средняя и южная зоны европейской части страны. К северу встречается только у населенных пунктов в Западной Сибири и Казахстане. Пустырник пятилопастный более широко распространен. В Беларуси преобладает пустырник обыкновенный.

Местообитание. На пустырях (отсюда и название растения), в оврагах, вдоль дорог, во дворах. Иногда образует заросли на месте бывших построек. Возделывается во многих совхозах лекарственных растений. Возможна культура на приусадебных участках. Пустырник сердечный — растение неприхотливое, возделывается на пропашных землях до четырех лет на одном месте. Удобряют и подкармливают навозом, суперфосфатом, хлористым калием. Размножают семенами. Весной сеют на глубину 2-3 см, под зиму — 1-1,5 см. Расстояние между рядами 60 см. Почву рыхлят, уничтожают сорняки, прорывают густые всходы. В первый год получают 4-7 ц/га товарного сырья, на второй — четвертый годы — по два урожая (20-30 ц/га).

Заготовка, первичная обработка и сушка. Собирают траву в фазу бутонизации и начала цветения, срезая ножами, секаторами или серпами верхушки стеблей и их разветвления длиной до 40 см и толщиной не более 0,5 см, но не вырывая с корнем. Соблюдение правил заготовки позволяет использовать заросли 3-5 лет подряд, после чего им необходимо давать «отдых» на 1 год. Уборку травы с плантаций производят в начале цветения жатками (верхнюю часть — побеги 30-40 см). Скошенную массу слегка подвяливают в поле и перевозят к месту сушки. Перед сушкой траву измельчают.

Сушат на чердаках или под навесами, в сушилках с хорошей вентиляцией, разложив тонким слоем и периодически перемешивая. Тепловую сушку проводят в огневых сушилках при температуре нагрева сырья до 50-60°С.

Стандартизация. Качество сырья регламентировано требованиями ГФ XI, Изм. 1-5.

Охранные мероприятия. Периодичность заготовки 2 года. Нельзя вырывать стебли с корнями.

Внешние признаки. Трава ручной уборки состоит из цветущих верхушек со стеблем длиной до 40 см, толщиной до 0,5 см.

Трава механизированной уборки представляет собой куски стеблей, листьев и соцветий. Стебель часто продольно расщепленный, длиной до 20 см, толщиной до 0,5 см.

Измельченное сырье. Кусочки стеблей, листьев и соцветий, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Цвет серовато-зеленый. Запах слабый. Вкус горьковатый.

Порошок. Кусочки стеблей, цветоносов и соцветий, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Цвет от серовато-зеленого до коричневато-зеленого с многочисленными беловатыми, желтовато-белыми, серовато-белыми, розово-фиолетовыми вкраплениями.

В некоторых южных районах встречаются близкие виды пустырника, трава которых ошибочно может быть собрана неопытными сборщиками.

Пустырник сизый L. glaucescens Bunge отличается сизой окраской стеблей и листьев вследствие опушения плотными короткими прижатыми волосками; соцветие длинное, с расставленными нижними мутовками; венчик светло-розовый с цельнокрайней нижней губой.

Пустырник сибирский L. sibiricus L. имеет листья, рассеченные на узкие, линейные доли, венчик беловато-розовый, до 3 см длиной.

Пустырник татарский L. tataricus L. в отличие от предыдущих видов опушен длинными волосками только в верхней части стебля. Чашечка ширококоническая, длинноволосистая; венчик розово-фиолетовый, нижняя губа, как у пустырника сизого.

Следует заметить, что требуются дополнительные исследования указанных таксонов. Возможно, их также можно будет использовать подобно официнальным видам.

Отличительные признаки различных видов пустырника

Пустырник сизый — Leonurus glaucescens Bge.

Растение высотой около 1 м, сизое от прижатых волосков. Соцветие длинное, нижние мутовки расставленные, чашечка узкоконическая, венчик светло-розовый, нижняя губа цельная. Распространено повсеместно.

Пустырник татарский — L. tataricus

Растение высотой 50-100 см. Опушено только в верхней части длинными волосками. Чашечка ширококоническая. Венчик розовато-фиолетовый с цельной нижней губой. Растет в Западной и Восточной Сибири.

Пустырник сибирский — L. sibiricus L.

Растение высотой 30-60 см. Опушено длинными волосками. Чашечка правильная, колокольчатая. Венчик розовый со шлемовидной верхней губой. Растет в Западной и Восточной Сибири.

Не допускается также белокудренник черный — Ballota nigra L., растущий в тех же местах, что и пустырник сердечный. Стебли у него коротковолосистые, волоски наклонены вниз. Листья округло-яйцевидные, или яйцевидно-ланцетовидные, черешки короткие, венчики цветков грязно-розовые.

На микроскопии в отличие от других растений семейства яснотковых устьица окружены 4-5, реже 2 околоустьичными клетками, а эфирномасличные железки небольшие, состоят из 2-8 выделительных клеток. Волоски типичные для пустырника: длинные, многоклеточные, грубобородавчатые, расширенные в местах соединения клеток, "суставные" (диагностический признак), встречаются в большом количестве. По краю листа расположены согнутые волоски.

Микроскопия. При рассматривании листа с поверхности характерным является наличие эфирно-масличных железок с короткой ножкой и 4-6 (реже 8) выделительными клетками. Встречается два типа волосков: многоклеточные грубобородавчатые и мелкие головчатые волоски на одно- или двуклеточной ножке с округлой головкой (из 1-2 клеток). Устьица окружены 4-5 околоустьичными клетками (аномоцитный тип) в отличие от обычного диацитного типа у губоцветных.

В порошке видны фрагменты листьев, стеблей и цветков. Эпидермис стебля образован сильновытянутыми клетками с прямыми стенками, а клетки эпидермиса чашечки и венчика очень мелкие. Все частицы порошка (листьев, стеблей и цветков) опушены многочисленными простыми бородавчатыми волосками, более редко встречаются головчатые волоски и округлые эфирномасличные железки; встречаются также шаровидные пыльцевые зерна.

При смачивании порошка травы 1%-ным спиртовым раствором алюминия хлорида и просвечивании его в УФ-свете все ткани флуоресцируют ярко-золотисто-желтым цветом (флавоноиды).

Числовые показатели. Цельное сырье. Экстрактивных веществ, извлекаемых 70%-ным спиртом, не менее 15%; влажность не более 13%; золы общей не более 12%; золы, нерастворимой в 10%-ном растворе кислоты хлористоводородной, не более 6%; почерневших, побуревших и пожелтевших частей растений не более 7%. Допускается не более 3% органической примеси и не более 1% минеральной.

Измельченное сырье. Частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм, не более 17%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 10%. Остальные показатели такие же , как для цельного сырья.

Порошок. Частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм, не более 10%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, не более 15%. Кроме того, регламентируется содержание экстрактивных веществ, влажность, золы общей, золы, нерастворимой в 10%-ной кислоте хлористоводородной, минеральной примеси (также как для цельного сырья).

Изменение № 5 к ГФ XI предусматривает определение содержания суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат в сырье, предназначенном для приготовления настойки. Определение проводят методом фотоэлектроколориметрии или спектрофотометрии и рассчитывают содержание иридоидов (в процентах) по удельному показателю поглощения стандартного образца гарпагида ацетата. Их содержание в сырье должно быть не менее 0,3%.

Для подтверждения присутствия в траве иридоидов используют качественную реакцию с гидроксиламином и хлоридом окисного железа и тонкослойную хроматографию на пластинках с силикагелем (проявление реактивом Шталя).

Химический состав. В траве пустырника содержатся флавоноидные гликозиды — рутин, квинквелозид, космосиин, кверцитрин, гиперозид, кверцимеритрин; дубильные вещества (до 2,5%); иридоиды (аюгол, аюгозид и галиридозид); горькие гликозиды со стероидным скелетом и азотистые основания (холин, стахидрин).

Хранение. В сухих затемненных помещениях. В аптеках — в ящиках, на складах — в тюках. Срок годности до 3 лет.

Фармакологические свойства. Препараты пустырника обладают седативными свойствами, понижают АД, замедляют ритм сердечных сокращений, обладают противосудорожной активностью в эксперименте. Оказывают благоприятное влияние на углеводный и жировой обмен, снижают уровень глюкозы, молочной и пировиноградной кислот, холестерина, общих липидов в крови, нормализуют показатели белкового обмена.

Лекарственные средства. Трава пустырника, трава в круглых брикетах, настой, настойка, входит в состав сборов успокоительных.

Применение. Старое народное средство. Пустырник изучал в Томском медицинском институте проф. Н. В. Вершинин. Препараты по характеру действия близки к препаратам валерианы лекарственной.

Препараты пустырника применяют в качестве успокаивающего средства при повышенной нервной возбудимости, сердечно-сосудистых неврозах, гипертонической болезни, ишемической болезни сердца, миокардите, тиреотоксикозе, бессоннице, вегетососудистой дистонии, неврастении и психастении, неврозах. Положительные результаты дает применение пустырника у больных в преклимактерическом и климактерическом периодах при функциональных расстройствах центральной нервной системы. Назначают его также при неврозах желудочно-кишечного тракта, метеоризме, спастических болях.

Настойка пустырника (Tinctura Leonuri) готовится на 70% спирте (1:5). Прозрачная жидкость зеленовато-бурого цвета, слабого запаха, горькая на вкус. Выпускается во флаконах-капельницах по 25 мл. Назначают по 30-35 капель 3-4 раза в день.

Экстракт пустырника жидкий (Extractum Leonuri fluidum) — жидкость буро-зеленого цвета и горького вкуса, со слабым своеобразным запахом. Готовят на 70% спирте. Назначают по 15-20 капель 3-4 раза в день.

Настой из травы пустырника готовят из расчета 15 г травы на 200 мл воды. Принимают по 1/3 стакана 2 раза в день за 1 ч до еды. Пустырник входит в состав ряда лекарственных сборов.

Ссылка на основную публикацию
Кокосовое молоко для чего используется
Без этого здорового и модного сегодня продукта не может обойтись азиатская кухня. Кокосовое молоко получило признание и в других частях...
Когда сажать флоксы в открытый грунт осенью
Флокс – яркое растение, цветы которого имеют разнообразную окраску. По своей природе они относятся к неприхотливым культурам, но от правильного...
Когда сажать черемшу осенью в открытый грунт
Выращивание черемши на даче поможет вам всегда иметь под рукой полезную зелень. Не всегда есть возможность отправиться на природу за...
Кокосовое молоко польза и вред для ребенка
Кокос обладает нежным вкусом и экзотическим ароматом. В пищу применяют мякоть, сок, молоко, масло и даже сахар. В составе плодов...
Adblock detector